抗震颤麻痹药

 

抗震颤麻痹药的药效学研究推荐大鼠旋转动物模型为主要必做的实验，大动物旋转模型仅供有条件时使用。实验药物溶解度要保证良好，若用助溶或赋形剂，要与对照组保持一致。旋转模型动物可重复给药，其给药间隔视所用药物性质而定，实验治疗药物可近期（如一天）重复给药，观察动物反应性有否改变；肌肉震颤治疗实验至少要选用两种药物性肌肉震颤模型进行观察，以便对药理性质进行比较分析，豚鼠左旋与肌肉震颤治疗实验两者任选一种即可。动物实验治疗药物的给药途与临床用药主要途径符合；治疗实验必须设对照组及不同剂量组（每组动物5-10只），同时或同日实验观察，观察指标定量或半定量，最后数据用统计学分析进行说明。治疗药物疗效剂量要与毒性剂量比较，并与已知有效药比较。

一、大白鼠单侧黑质纹状体通路毁损引起旋转的模型

选约200g大鼠，腹腔注射30mg/kg·ip去甲丙咪嗪，麻醉，固定于立体定位仪。按标准坐标于单侧纹状体黑质部位注射2mg/mL新配、冷却保存的6-羟基多巴胺生理盐水溶液（内含0.2mg/ml抗坏血酸）进行定量、定容、定时微量注射，留针3分钟左右；对侧脑区进行无药的同溶质对照注射。术后封闭伤口。动物饲养二周左右可进行首次分组给药治疗实验，全部实验结束后，大鼠脑制成标本及组织切片，观察入针部位及黑质纹状体神经元损毁情况。

二、药物性肌肉震颤实验

（1）槟榔碱震颤：成年小白鼠，槟榔碱25mg/kg，ip或sc，一般给药后3-5分钟出现震颤，持续约30分钟。

（2）氧合震颤素震颤：方法同上。腹腔给药，剂量0.15mg/kg，ip。给药后几分钟出现震颤，持续约30分钟。

（3）去氢骆驼蓬碱震颤：腹腔给药10-40mg/kg，迅速发生震颤，持续20-30分钟。给药100mg/kg以上可引起痉挛死亡。

三、豚鼠胆碱性左旋法模型

选取约300g豚鼠，局麻下分离双侧颈总动脉。从头端结扎右颈总动脉，然后将金属插管取向心方向固定于右颈总动脉腔内，缝合切口。

受试药可口服或用其他方法给药，一定时间间隔后右颈总动脉插管给约1Ml 0.3mg/kg毒扁豆碱，给药时间须严格控制，勿多于半分钟。给药时夹紧左颈总动脉以保证尽量多的药物经右椎动脉刺激右侧纹体黑质胆碱能神经元，豚鼠在药后半分钟内出现头偏左、体左旋等运动，持续约5分钟。

四、观察指标

1. 旋转行为模型  大白鼠单侧纹状体黑质DOPA通路毁损模型

于大鼠术后2-3周，分组进行旋转运动比较观察，观察时间尽可能集中或同时进行。旋转活动要定量或分级，优势旋转方向数目要减掉方向的运动数，按时间时间加和求均值及其标准误。诱发运动的药物作用机制明确公认。合并给药时间合理，要有三个以上不同剂量组，以便观察一效关系，对结果进行统计比较及回归分析。

2.震颤实验观察指标

可用各种类型震动笼对全身肌肉震颤进行定性及定量分析，可对局部肌肉进行烟鼓记纹或将肌肉震动经电磁换能而由记录仪记录。若无条件，可对肌肉震颤进行肉眼分级的定量比较。观察活动的大小变化；时间—效应；剂量—效应变化，并在统计基础上进行药理及药效说明。

3.豚鼠胆碱性左旋模型观察指标

   通过不同剂量治疗组、对照组动物间在给毒扁豆碱后一定时间内左旋运动等指标的差异，经统计分析解释药物的活性。