保肝药

 

保肝药的药效学研究一般选择SPF级小鼠或大鼠进行实验。溶于水的保肝药物，配成生理盐水或蒸馏水溶液，给药途径必须与临床给药途径一致；不溶于水的药物可用少许吐温-80配制成含2%吐温-80的悬液，或用0.5%羧甲基纤维素钠配成混悬液，可口服或皮下注射，另设相同容积的溶剂对照组。在观察药物疗效前，应首先观察待试药物的急性毒性，测定出半数致死剂量（LD₅₀），—般而言，可取1/3，1/5及1/10LD₅₀作为治疗剂量。对测不出LD₅₀的药物，应摸出最大浓度和最大允许容积，以便选择合适的治疗剂量。

一、急性肝损伤实验方法及疗效评价

（1）四氯化碳诱导的急性肝损伤模型：按10mL/kg腹腔注射0.1% 四氯化碳橄榄油溶液或按10mL/kg皮下注射0.5%四氯化碳橄榄油溶液诱导出急性肝损伤模型大鼠。

（2）D-氨基半乳糖诱导的急性肝损伤模型：小鼠按照800mg/kg或大鼠按照350-500mg/kg腹腔注射D-氨基半乳糖溶液诱导出急性肝损伤模型。

将动物随机分为受试药物高、中、低3个剂量组，加设正常对照组、模型对照组、阳性对照组。急性试验提前0.5-1小时给药1次或提前24小时给药多次。注射肝脏毒物18-24小时后断头法处死动物，收集血液，分离血清，测天门冬氨酸氨基转换酶（AST），丙氨酸氨基转换酶（ALT），每只动物取同一叶肝脏部位大致相同的—小块肝组织固定于10%福马林，做病理切片检查，疗效判断标准应与对照组比较时，转氨酶显著降低，肝脏病理损伤减轻。

二、大鼠慢性肝损伤实验

（1）四氯化碳诱导的慢性肝损伤模型：皮下注射2mL/kg 25%四氯化碳橄榄油溶液或5mL/kg 10%四氯化碳橄榄油溶液，2次/周，连续3个月诱导出慢性肝损伤模型大鼠。药物治疗于中毒第2或第3个月起开始治疗，随机分为模型对照组、阳性对照组、受试药物低、中、高剂量组，外设一个阴性对照组，10只/组。每天给药1次，连续给药1-2个月。

（2）观察指标：末次给药24小时后，断头处死大鼠，留血液，分离血清，测AST，ALT，总蛋白，白蛋白，A/G（白蛋白/球蛋白）比例，唾液酸，肝脏取—部分测定羟脯氨酸含量，作为判定肝纤维化形成程度，另外，同急性肝损伤试验，每只大鼠取小块肝脏按常规做病理切片检查。

（3）疗效判定标准：

比较治疗组与损伤对照组间各项测定指标间差岸的显著性，睡液酸和羚脯氨酸系作为肝纤维化的指标。

三、小鼠免疫性肝损伤模型

可选用内酸杆菌或卡介苗（B.C.G）加脂多糖（LPS）法进行。或者刀豆蛋白A诱导的免疫性肝损伤模型小鼠。