缓解体力疲劳功能评价方法

1 试验项目

1.1 负重游泳实验

SPF级NIH小鼠，雌性，50只，检疫3天，随机分为别阴性对照组，阳性药对照组，受试样品低、中、高剂量组，10只/组。对照组给予蒸馏水、阳性组给予阳性药物，各给药组分别给予相应剂量的药物，连续给药30天。末次给予受试样品30min后，将尾根部负荷5％体重铅皮的小鼠置于游泳箱中游泳。水深不少于30cm，水温25±1℃，记录小鼠自游泳开始至死亡的时间，即小鼠负重游泳时间。

1.2 血清尿素氮实验

     SPF级NIH小鼠，雌性，50只，检疫3天，随机分为阴性对照组，阳性药对照组，受试样品低、中、高剂量组，10只/组。对照组给予蒸馏水、阳性组给予阳性药物，各组给予相应剂量的药物，连续给药30天。末次给受试样品30min后，在温度为30℃的水中不负重游泳90min，休息60min后采血。置4℃冰箱约3h，血凝固后2000prn/min离心15min，取血清，采用全自动生化仪测定尿素氮和磷酸肌酸激酶（CK）水平。

1.3 肝糖元实验：

SPF级NIH小鼠，雌性，50只，检疫3天，随机分为阴性对照组，阳性药对照组，受试样品低、中、高剂量组，10只/组。对照组给予蒸馏水、阳性组给予阳性药物，各组给予相应剂量的药物，连续给药30天。末次给受试样品30min后处死动物，取肝脏经生理盐水漂洗后用滤纸吸干，精确称取肝脏100mg，按照肝糖元试剂要求测定肝糖元的含量。

1.4 血乳酸实验

SPF级SD大鼠，雄性，50只，检疫3天，随机分为阴性对照组，阳性药对照组，受试样品低、中、高剂量组，10只/组。对照组给予蒸馏水、阳性组给予阳性药物，各组给予相应剂量的药物，连续给药30天。

（1）末次给受试样品30min后取血，然后不负重在温度为30℃的水中游泳10min后停止，然后采血。休息20min后再采血。用乳酸仪测定小鼠游泳前血乳酸值、游泳10min后血乳酸值和休息20min后的血乳酸值。

血乳酸曲线下面积＝1/2（游泳前血乳酸值+游泳后0min的血乳酸值）×10+1/2（游泳后0min的血乳酸值+游泳后休息20min的血乳酸值）×20

（2）取肝脏，冷冻保存，检测肝脏中MDA、SOD和谷胱甘肽过氧化物酶的水平。

2 . 试验原则

2.1 动物实验所列指标均为必做项目。

2.2 实验前必须对同批受试样品进行违禁药的检测。

2.3 运动实验与生化实验指标检测相结合。

3. 结果判定

    负重游泳实验结果阳性，且血乳酸、血清尿素、肝糖原/肌糖原三项生化指标中任两项指标阳性，可判定该受试样品具有缓解体力疲劳功能的作用。