绒促性素生物测定法

本法系比较绒促性素标准品（S）与供试品（T）对雌性幼小鼠子宫增重的作用，以测定供试品的效价。

溶剂的制备  试验当日，称取牛血清白蛋白适量，加0.9%氯化钠溶液溶解，制成每1ml中含1mg的溶液，充分溶解后，用1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至7.2±0.2。

标准品溶液的制备  试验当日，按绒促性素标准品的标示效价，用上述溶剂，按高、中、低剂量组（ds1、ds2、ds3）配成3种浓度的稀释液，相邻两浓度之比值（r）应相等，且不得大于1：0.5。一般高浓度稀释液可制成每1ml中含0.14-0.8单位。调节剂量使低剂量组子宫较正常子官明显增重，高剂量组子宫增重不致达到极限。稀释液置2-10℃贮存，可供3日使用。

供试品溶液的制备  按供试品的标示量或估计效价（AT），照标准品溶液的制备法制成高、中、低（dT1、dT2、dT3）3种浓度的稀释液，相邻两浓度之比值（r）应与标准品相等，供试品与标准品各剂量组所致反应平均值应相近。

测定法  取健康合格，出生15-23日，或体重9-13g，同一来源的雄性幼小鼠，一次实验所用小鼠的出生日数相差不得超过3日，或体重相差不得超过3g；按体重随机等分成6组，每组不少于10只。每日于大致相同的时间分别给每鼠皮下注入一种浓度的标准品或供试品稀释液0.2ml，每日1次，连续注入3次，于最后1次注入24小时后，将动物处死，称体重，解剖，于阴道和子宫交接处剪断，摘出子宫，剥离附着的组织，去掉卵巢，压干子宫内液，直接称重（天平精密度为0. 1mg）并换算成每10g体重的子宫重，照生物检定统计法（通则1431）中的量反应平行线测定法计算效价及实验误差。

本法的可信限率（FL%）不得大于25%。

 

2019年8月23日 10:27
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