白细胞减少症防治药

试验升高白细胞药时，必须选用小鼠和犬白细胞减少模型各一项。但若小鼠选用化疗药所致白细胞减少模型时，则大动物应选择辐射所致白细胞减少模型，反之亦然。大动物试验中，若有条件，可在活杀动物时涂骨髓片做骨髓分类计数。实验条件必须严格控制。所述的实验模型，血小板变化过程与白细胞基本一致，故这些模型亦可适用于升高血小板的药物。试验升血小板药时应增加CFU-Meg （巨核系细胞生成单位）等指标。实验宜选用小鼠LACA、C₅₇（80天左右，体重18-22克，雌雄均可），其它品系动物亦可。犬可用家犬（年龄2-4岁，同一批试验动物体重相差不得超过4公斤），有条件时可用Beagle狗（年龄1岁左右，雌难均可）。

一、环磷酰胺（Cy）或阿糖胞苷（Ara-C）所致小鼠白细胞减少症的实验方法

小鼠腹腔注射Cy 100mg/kg，每日一次，连续3天，或小鼠 腹腔注射Ara-C 250mg/kg，每日一次，连续3天，停药后3天左右白细胞下降至药前值得20-30%。实验动物分成5组：A， B，C，D，E，每组5只动物。

A组———受试药物低剂量组。给受试药5天（每日给药次数，视受试药的性质而定，一般为1—2次），第3天给受试药的同时腹腔注射Cy或Ara—C，每日一次，连续3天。

B组———受试药中剂量组。用药方式同A组。

C组———受试药高剂量组。用药方式同A组。

D组———阳性药对照组。实验动物给予阳性药。Cy或Ara—C用法同A组。

E组———模型对照组。在相应的时间内给子药物溶剂。Cy或Ara-C用法同A组。

各组动物于末次给Cy或Ara-C后3天，各取3只动物测定CFU-S （脾结节生成单位）和CFU-GM （粒系和单核一巨噬细胞团生成单位）。测定方法参照《药理实验方法学》第42章或其它有关书刊，此实验应重复1-2次。

二、辐射所致白细胞减少症的实验方法

小鼠经7.50 Gy（剂量率为450伦/分左右时）照射后3-5天，骨髓DNA（或有核细胞总数）下降至最低水平，照射后7-9天白细胞下降至最低值。此模型可测算脾脏系数 （脾重/体重），直接计脾表面CFU-S数和测定骨髓DNA含量或骨髓有核细胞总数等指标。

实验时动物同分为5组，每组至少10只动物。

A组———受试药低剂量组。预防性（照射前）或治疗性（照射后）给予受试药均可。

B组———受试药中剂量组。给药方式同A组。

C组———受试药高剂量组。给药方式同A组。

D组———阳性药对照组。实验动物给予阳性药。

E组———对照组。在相应时间内给子药物溶剂。

各组动物于照射后7天称体重脱日处死，取脾脏称重，后固定于Bouin氏液， 6小时后取出计脾表面遣血灶（CFU-S）数。取一侧完整股骨测定骨髓DNA或计骨髓有核细胞总数。

三、Cy所致犬白细胞减少症的实验方法

犬口服Cy 5-7mg/kg，每日一次连服5天，药后（系指第一次口服Cy后）7-11天白细胞下降至最低值水平，约为药前值得30%左右。实验可选用犬随机分成受试药高、中、低剂量组，阳性药对照组和模型对照组，4-6只/组。实验动物观测 21天，观测指标及观察时间如下：

临床表现：活动、食欲、呕吐、二便、体温、感染、出血等每日记录一次，体重每周一次。

血细胞计数：白细胞及分类、血小板、血红蛋白（或红细胞）、网织红细胞，药后第一天开始隔日一次。

骨髓细胞：有核细胞总数，有条件时可做骨髓涂片分类或CFU—GM等，药后21天活杀动物前进行。

病理组织学检查，于药后21天活杀动物后进行，其重点为造血组织和有变化的组织。

四、⁶⁰CO—γ射线对屏蔽骨盆的犬照射6.5Gy （剂量率为100伦/分左右时）所致白细胞减少症的实验方法

实验犬于照射前用长20cm，宽10cm，高5cm的铅砖7块，平放于骨盆前2cm处，⁶⁰CO-γ射线双侧照射。动物无屏蔽处组织吸收剂量为6. 50Gy，屏蔽处组织吸收剂量为0.40-0.60 Gy。实验动物照射后7-9天白细胞下降至最低水平，均为药前值的20%左右。实验动物观察30天。观测指标及观测时间参照实验（三）。骨髓有核细胞总数、CFU-GM等，于药后31天活杀动物前进行。病理组织学检查于药后31天活杀动物后进行。