治疗心肌炎药

进行病毒性心肌炎实验时,要严格消毒,按病毒实验要求进行操作。根据所试药物的适应症,可任选一种心肌炎病理模型,包括体内试验和体外试验;选一种用药物引起心肌缺血时,观察所试药物是否有抗心肌缺血作用。

一、病毒性心肌炎

1.体外模型(病毒性):取新生3-4天SD大鼠的心脏,用0.1%胰蛋白酶分次消化所得细胞悬液作心肌细胞培养18小时,待心肌细胞贴壁后弃去培养液,加入有柯萨其B病毒的培养液培育1小时,洗去病毒,随机分为空白对照组;病毒感染对照组;病毒感染+受试药物组(3-4个不同浓度);正常细胞+受试药物组(3-4个不同浓度)。观察指标:进行测试3天后的结果为好。

(1)倒置显微镜下观察心肌细胞的搏动次数及变化%。

(2)测定上清液中心肌酶活力如LDH、SGOT、CK等。

(3)光镜下观察培养心肌细胞的病变程度。

(4)细胞冻融三次后滴定病毒滴度,在Hep—2或Wish细胞上测TCID50。 

2.体内模型:取3-4周龄BABL/C雄性小鼠,给腹腔注入克萨其B病毒,形成心肌炎模型。实验分组:正常小组对照组;病毒感染组;病毒感染+药物组;药物对照组。

二、中毒性心肌炎

1. 体外模型:培养心肌细胞模型的制备是在培养心肌细胞加入阿霉素1μg/ml,作用1小时即可引起心肌细胞损害。随机分为对照组;阿霉素对照组;阿霉素+受试药物组(3-4个不同浓度)。观察指标:

(1)倒置显微镜下观察心肌细胞的搏动次数及变化%。

(2)测定上清液中心肌酶活力如LDH、CK等。

(3)光镜下观察培养心肌细胞的损伤程度。

2. 体内模型:取150-200g Wista大鼠,静注5mg/kg阿霉素,作用1小时造成急性心肌炎或静注2mg/kg/周,注射10周,造成亚急性心肌炎模型。随机分为实验对照组;阿霉素对照组(2-3个剂量)。观察指标:

(1)测定心肌酶谱如LDH、CK等。

(2)光镜下观察福尔马林中的超微结构。
 

2019年8月7日 11:02
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