抗血小板聚集药
抗血小板聚集药常用家兔和大鼠,为避免性周期影响宜用雄性动物。阳性对照药可选用作用机理相似 的药,例如环氧酶抑制剂阿司匹林;TXB2合成酶制剂咪唑;腺苷酸环化酶激活剂前列腺素E1。实验时要注意动物种属差异。例如肾上腺素只能诱导人和猫的血小板聚集;大鼠血小板无PAF受体,PAF不能使其血小板聚集。
一、血小板功能测定(体内给药)
1.血小板聚集性:
用比浊法或其他方法观察血小板聚集性。选择至少3种诱导剂(二磷酸腺苷、胶原、花生四烯酸、凝血酶等),观察最大聚集率。诱导剂的聚集率应在50%以上,对照组与实验组结果用统计学处理。
2.用玻球法(用粘附仪测定)或玻柱法测定血小板粘附性。
3.测定血小板的释放产物(根据药物作用的不同选择):
(1)五羟色胺:用[14C]5HT或[3H]5HT标记血小板;也可以用荧光光度法。
(2)血栓素A2(TXA2):用放免法测TXB2。
(3)三磷酸腺苷或Ca2+:部分血小板聚集仪除测聚集性外,同时可测ATP或Ca2+。
(4)β-血小板球蛋白(β-TG):放免法测定。
(5)血小板因子4(PF4)活性测定:放免法测定。
4.血管壁前列腺素(PGI2)活性测定:放免法测6-keto-PGF1α。
5.测定出血时间。
二、血小板依赖性血栓形成试验(体内给药)
1.动静脉旁路丝线上血栓形成法:测血栓干重和湿重。
2.主动脉旁路聚乙烯管内血栓形成法:测定聚乙烯管内血栓形成所需时间。
3.电流损伤劲动脉内膜法:常用大鼠。检查有无血栓形成,并测血栓形成时间。
4.激光损伤微血管法:常用小鼠肠系膜血管。记录栓塞形成时间,第一个栓子出现时间和15分钟内栓子的数目。
5.静脉注射血小板聚集诱导剂法:血小板聚集诱导剂至少用一种。常用小鼠,观察呼吸窘迫症状和死亡率。
2019年8月7日 10:18
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