防治脑血管病和脑缺血药

引起脑缺血的病很多，评价药物的难度较大，应根据所试药物的适应症，选用相应的方法来评定药物作用。

1. 用于治疗脑栓塞的药物需进行：（1）离体实验；（2）大脑中动脉阻断实验；（3）SHRSP脑卒中的预防或治疗；（4）全脑缺血及缺氧实验中选1-2个。

2. 蛛网腔下出血：（1）离体实验；（2）脑血管解痉实验

3. 高空脑缺氧或心脏骤停引起的脑缺氧：（1）耐缺氧实验2种方法；（2）全脑缺血1-2种方法。

治疗脑卒中和脑缺氧急性期的药物需静注或静滴，可预防给药或脑卒中后一定时间给药。脑卒中后遗症药物需长期治疗，给药途径以口服为宜。实验过程中，很多麻醉剂对脑有保护作用，因此应严格选择麻醉剂，麻醉时要检测血气；要严格控制温度，室温相差不要超过±1℃，体温保持37-38℃，头部温度的恒定特别重要。

脑流血的测定方法很多，注意方法的可靠性。脑组织学检查除梗塞面积（TTC染色）、神经细胞病变外，还包括脑水肿，不能单独测脑水肿。观察行为和脑功能要客观细致。生化指标包括能量代谢和毒性产物，如乳酸、ATP、磷酸肌酸、氧及葡萄糖摄取率，自由脂肪酸，脂质过氧化产物，兴奋性氨基酸等。由于有些方法难度大，在没有条件时，可先测能量代谢和脑组织的氧分压和PH值。

一、离体实验

用高钾及其他激动剂（去甲肾上腺素或5-羟色胺）引起家兔基底动脉及其他血管收缩，求出所试药物抑制血管收缩的IC₅₀，以了解药物作用的组织选择性。

二、在体实验

1.耐缺氧实验

(1)小 鼠低压缺氧实验：取体重约为20g的小鼠，雌雄各半，放置在低压的密闭瓶内，观察动物存活时间及在一定时间内动物死亡数，求出ED₅₀。

(2)大鼠缺氧性缺氧实验：将150-180g放置在充氮的瓶内，1min后立即取出，观察1h大鼠死亡数，对照组全部死亡，求出给药组和阳性药对照组ED₅₀。

(3)组织中毒性缺氧：先用大鼠或小鼠，快速静注5mg/kg氰化钾，对照组死亡率90%，求出给药组和对照组ED₅₀。

(4)高碳酸性缺氧：麻醉大鼠人工呼吸，注射肌肉松弛剂。记录大脑感觉运动区的脑电图（EEG），当EEG平稳后，去掉人工呼吸2min，记录从停止人工呼吸到EEG消失的时间。10min后再次停止人工呼吸3min，观察EEG恢复到正常的时间。

2.全脑缺血实验

(1)大鼠四脑动脉阻塞模型：即双侧椎动脉和双侧颈动脉阻断。

(2)大鼠三脑动脉阻断模型：即阻断大鼠的基底动脉和双侧颈动脉。

(3)阻断大鼠双侧颈总动脉加上放血或滴注易控性降压药。

(4)小鼠断头缺血法：即小鼠断头后不同时间内迅速取脑，测定脑组织的乳酸，ATP和磷酸肌酸等。

3.局灶性脑缺血模型

（1）大脑中动脉阻断法：将大鼠大脑中动脉分离出来结扎，也可以用电凝或热凝的方法阻断，造成局灶性脑缺血性损伤，形成脑梗塞灶。观察指标：梗塞面积；梗塞边缘区的组织学或血流量。

（2）脑多发性梗塞：从大鼠的颈内动脉注入一定大小塑料微球或致凝物质，可形成多发性脑梗塞。

（3）电刺激家兔或大鼠的颈动脉，或局部注射Fecl₂可引起局部损伤性血栓形成。

观察指标：脑组织损伤情况；一段时间后的条件反射或行为。

4.脑卒中模型:

选用6-7周龄脑卒中自发性高血压大鼠，每天饮用一定量的1%盐水，以促进脑卒中发生。比较空白对照组。阳性药对照组和所试药组的预防和治疗作用。

观察指标：血压和心率；体重；脑卒中行为评分（如下图）；组织学检查；存活时间及死亡率。

脑卒中评分

评分	症状
0	正常
1	运动轻度减少或轻度兴奋
2	运动明显减少或激惹性亢进
3	不能步行、忧郁性症状
4	不能站立、后肢麻痹、偏瘫、尿失禁等